含量测定（总黄酮）检测

总黄酮含量测定的意义与应用

总黄酮（Total Flavonoids）是一类广泛存在于植物中的天然活性化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。由于其显著的药理作用，总黄酮含量的检测在食品、药品、保健品及植物提取物质量控制中具有重要价值。例如，银杏叶、葛根、金银花等药用植物中黄酮类成分的含量直接影响其功效，因此建立准确、的检测方法对产品开发与质量控制至关重要。

检测项目与范围

总黄酮含量测定的核心目标是定量分析样品中黄酮类化合物的总含量，通常以芦丁（Rutin）或其他标准品为对照进行换算。检测对象包括：

• 植物原料（如叶片、根茎、果实等）
• 中药制剂（颗粒、胶囊、片剂等）
• 功能食品（茶饮、保健酒等）
• 化妆品原料（植物提取液）

常用检测仪器

总黄酮含量的测定依赖于以下关键仪器：

• 紫外-可见分光光度计：用于比色法测定显色后的吸光度
• 液相色谱仪（HPLC）：适用于单体黄酮的分离与定量
• 超声波提取仪：用于样品前处理的快速溶剂提取
• 恒温水浴锅：控制显色反应温度
• 分析天平：精确称量样品与标准品

主要检测方法

目前主流的检测方法包括：

1. 紫外分光光度法（AlCl3显色法）

通过铝离子络合显色反应，在510 nm波长处测定吸光度，建立标准曲线计算总黄酮含量。该方法操作简便、成本低，适用于大批量样品筛查。

2. 液相色谱法（HPLC）

采用C18色谱柱，以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，通过紫外检测器（通常为254 nm或360 nm）对特定黄酮单体进行定量分析。此方法灵敏度高、特异性强，但需标准品对照。

3. 质谱联用法（LC-MS）

结合液相色谱与质谱技术，可同时进行定性与定量分析，适用于复杂基质样品的测定。

主要检测标准

国内外常用的检测标准包括：

• 中国药典（2020版）通则0401 紫外-可见分光光度法
• GB/T 31743-2015《茶制品中黄酮类化合物的测定》
• ISO 14502-1:2005《绿茶和红茶中黄酮类物质测定》
• AOAC 999.11《植物提取物中总黄酮测定方法》

质量控制要点

为确保检测结果的准确性，需重点关注：

• 标准品溶液的稳定性验证
• 显色反应时间与温度的精确控制
• 样品提取溶剂的优化选择（常用70%乙醇或甲醇）
• 干扰物质的消除（如多糖、蛋白质等）
• 方法学验证（线性范围、精密度、回收率）