MDA检测

MDA检测概述

丙二醛（Malondialdehyde，MDA）是脂质过氧化反应的主要终产物之一，广泛用于评估生物体内的氧化应激水平和脂质过氧化程度。其检测在医学、食品科学、环境监测及农业研究等领域具有重要意义，尤其在疾病机制研究（如心血管疾病、神经退行性疾病）、药物抗氧化活性评价和食品质量检测中应用广泛。MDA检测的核心在于准确测定其浓度，需通过规范的检测项目、精密仪器、标准方法和质量控制体系共同实现。

MDA检测项目

MDA检测主要涉及以下项目：
1. 样本类型：血液、组织匀浆、细胞培养液、食品提取物等生物或化学样本；
2. 检测指标：MDA含量（通常以nmol/mg蛋白或μmol/L表示）；
3. 质控参数：包括线性范围（0.1-10 μmol/L）、检测限（0.05 μmol/L）、回收率（90-110%）和批内/批间精密度（CV<10%）。

MDA检测仪器

主流检测仪器包括：
1. 分光光度计：用于硫代巴比妥酸（TBA）比色法，波长532nm处测定吸光度；
2. 液相色谱仪（HPLC）：配备紫外或荧光检测器，可分离MDA-TBA加合物；
3. 气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）：通过衍生化处理实现高灵敏度检测；
4. 酶标仪：适用于高通量微孔板检测，提升实验效率。

MDA检测方法

常用方法及特点：
1. TBA比色法：
- 原理：MDA与硫代巴比妥酸在酸性条件下缩合生成红色产物
- 步骤：样本前处理→沸水浴反应→离心→比色测定
- 优势：成本低、操作简便，但易受其他醛类物质干扰
2. HPLC法：
- 采用C18色谱柱，流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（60:40）
- 检出限低至0.01 μmol/L，特异性显著优于比色法
3. ELISA法：
- 基于MDA特异性抗体的免疫学检测，适合复杂样本基质
- 灵敏度可达0.05 nmol/mL，适合微量样本检测

MDA检测标准

国内外主要参考标准包括：
1. 标准：
- ISO 6885:2016《动植物油脂 茴香胺值的测定》部分涉及MDA检测
- AOCS Cd 19-90 硫代巴比妥酸反应物（TBARS）测定标准
2. 标准：
- GB/T 5009.181-2003《食品中丙二醛的测定》
- WS/T 420-2013《血清中丙二醛的测定 液相色谱法》
3. 行业规范：
- 临床实验室需遵循CLSI EP17-A2文件进行方法验证
- 科研领域多参考《Free Radical Biology and Medicine》发表的技术指南

实验过程中需注意：样本需避免反复冻融、需加入抗氧化剂（如BHT）防止假阳性结果，同时需设置空白对照和标准曲线进行数据校正，以确保检测结果的准确性和可重复性。