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迟发超敏反应检测概述
迟发超敏反应(Delayed-Type Hypersensitivity, DTH)是一种由T淋巴细胞介导的免疫反应,通常在抗原暴露后24-72小时内出现临床症状。这类反应与即时过敏反应不同,其机制涉及抗原呈递细胞、Th1细胞和细胞因子网络的复杂调控,常见于接触性皮炎、结核菌素试验阳性反应及器官移植排斥等场景。检测迟发超敏反应对于评估机体细胞免疫功能、诊断特定疾病(如结核感染)以及监测免疫抑制治疗的效果具有重要意义。
在临床和科研中,迟发超敏反应检测主要通过体内和体外实验两种方式开展。体内检测以皮肤试验为主,通过局部抗原刺激观察炎症反应;体外检测则侧重于分析淋巴细胞活化和细胞因子分泌能力。检测结果需结合临床表现和实验室数据综合判断,以确保诊断的准确性。
检测项目
迟发超敏反应的检测项目主要包括以下几类:
- 斑贴试验:用于接触性皮炎诊断,检测过敏原引起的皮肤延迟反应
- 结核菌素皮肤试验(TST):评估结核分枝杆菌感染或疫苗接种后的免疫记忆
- 淋巴细胞转化试验(LTT):体外检测T细胞对特异性抗原的增殖反应
- 细胞因子检测:定量分析IFN-γ、IL-2等Th1型细胞因子水平
检测仪器
现代迟发超敏反应检测依赖于多种精密仪器:
- 斑贴试验贴敷器:用于标准化过敏原接触(如Finn Chamber®系统)
- 皮内注射器:结核菌素试验专用注射器(如Mantoux注射器)
- 酶联免疫斑点分析仪(ELISPOT Reader):自动分析IFN-γ分泌细胞数量
- 流式细胞仪:检测淋巴细胞表面标记和胞内细胞因子表达
检测方法
主流检测方法包括:
- 斑贴试验:将可疑过敏原贴于背部皮肤48小时,72小时后观察红斑、丘疹等反应
- 结核菌素皮内试验:向前臂皮内注射5IU PPD,48-72小时后测量硬结直径
- ELISPOT检测:分离外周血单核细胞,抗原刺激后检测IFN-γ分泌斑点
- 流式细胞术:通过CD69/CD25标记评估T细胞活化状态
检测标准
检测需遵循通用标准:
- 斑贴试验执行接触性皮炎研究组(ICDRG)判读标准
- 结核菌素试验采用美国CDC硬结直径分级标准(≥5mm为阳性)
- 体外检测参照CLSI H57-A淋巴细胞功能检测指南
- 细胞因子检测符合欧洲药典2.7.1生物活性物质检测规范
规范的检测流程和质量控制是确保结果准确性的关键,实验室需定期进行标准品验证和操作人员培训。
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