杀菌试验（悬液法）白色念珠菌检测

杀菌试验（悬液法）白色念珠菌检测概述

白色念珠菌（Candida albicans）是一种常见的条件致病性真菌，广泛存在于人体和环境中，可引发皮肤、黏膜及系统性感染，尤其在免疫力低下人群中危害显著。杀菌试验（悬液法）是评估消毒剂、抗菌材料或手段对白色念珠菌杀灭效果的核心检测方法之一，广泛应用于医疗、制药、日化及卫生监督等领域。该试验通过模拟实际场景中微生物与杀菌剂的动态接触，量化杀菌效率，为产品研发、质量控制及安全性评价提供科学依据。

检测项目

杀菌试验（悬液法）白色念珠菌检测的核心项目包括：

• 杀菌率测定：计算杀菌剂作用后存活菌数与初始菌数的比例，评估杀菌效果；
• 杀菌时间验证：确定达到特定杀菌率所需的作用时间；
• 重复性测试：验证不同批次或实验条件下结果的稳定性；
• 中和剂有效性验证：确保中和剂能及时终止杀菌剂作用，避免残留影响结果。

检测仪器

该检测需借助以下关键仪器设备：

• 生物安全柜：用于无菌操作，防止交叉污染；
• 恒温摇床：确保菌悬液与杀菌剂充分接触；
• 紫外-可见分光光度计：测定菌悬液浓度（OD值）；
• 菌落计数器：快速统计平板培养后的菌落数；
• 光学显微镜：辅助观察菌体形态变化。

检测方法

悬液法检测流程分为以下步骤：

1. 菌悬液制备：将白色念珠菌接种于沙氏液体培养基，37℃培养18-24小时，离心洗涤后调整至1×10⁶~1×10⁷ CFU/mL；
2. 杀菌剂处理：将菌悬液与测试样品按比例混合，设定不同作用时间（如0.5、1、5分钟）；
3. 中和反应：加入中和剂终止杀菌作用，震荡混匀；
4. 活菌培养：取混合液梯度稀释后涂布沙氏琼脂平板，37℃培养48小时；
5. 结果计算：统计各稀释度菌落数，按公式计算杀菌率（%）=（初始菌数-存活菌数）/初始菌数×100%。

检测标准

该检测需严格遵循相关标准及行业规范：

• GB 15981-1995《消毒与灭菌效果的评价方法与标准》；
• ISO 20743:2021《抗菌整理纺织品的抗菌活性测定》；
• WS/T 650-2019《抗菌和抑菌效果评价方法》；
• ASTM E2315-2016《评估液体化学杀菌剂对悬浮液中真菌杀灭效力的标准方法》。

标准中明确要求：有效杀菌率应≥99.9%（3 log减少），三次重复实验的变异系数需≤10%，并设置空白对照与中和剂毒性对照以确保数据可靠性。