液相色谱检测

液相色谱检测技术概述

液相色谱（Liquid Chromatography, LC）是现代化分析检测中应用广泛的技术之一，其核心原理是通过流动相（液体）与固定相（固体或液体）之间的相互作用，对复杂混合物中的组分进行分离、定性和定量分析。自20世纪60年代液相色谱（HPLC）技术问世以来，随着色谱柱材料、检测器和自动化技术的进步，液相色谱的灵敏度、分辨率和应用范围显著提升，现已成为药物研发、食品安全、环境监测、生命科学等领域的核心分析手段。

相比气相色谱，液相色谱适用于分析热稳定性差、分子量较大或挥发性低的化合物，尤其在高沸点有机物、生物大分子（如蛋白质、核酸）及离子型物质的检测中具有独特优势。现代超液相色谱（UHPLC）和液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）的发展，进一步推动了其在痕量分析和复杂基质检测中的应用。

液相色谱检测的典型项目

液相色谱技术可应用于以下重点检测领域：

• 药物分析：原料药纯度检测、制剂含量测定、代谢产物研究
• 食品检测：添加剂残留（如防腐剂、色素）、农药残留、营养成分分析
• 环境监测：水体/土壤中有机污染物（如多环芳烃、酚类）、重金属形态分析
• 生物医学：蛋白质组学、代谢组学、临床诊断标志物检测

核心检测仪器组成

典型液相色谱系统包含以下关键组件：

1. 输液泵：提供稳定高压流动相（如岛津LC-20AD、Agilent 1260）
2. 进样器：自动进样系统（如Waters 2777C）
3. 色谱柱：C18反相柱、HILIC亲水柱等（规格常见2.1×50mm~4.6×250mm）
4. 检测器：紫外-可见（UV-Vis）、二极管阵列（DAD）、荧光（FLD）、蒸发光散射（ELSD）
5. 数据处理系统：LabSolutions、Empower等色谱工作站

常用检测方法分类

根据分离原理和检测需求，主要方法包括：

• 反相色谱（RPLC）：基于疏水相互作用，适用于非极性/弱极性化合物
• 离子交换色谱（IEC）：用于带电物质分离（如氨基酸、核酸）
• 体积排阻色谱（SEC）：按分子尺寸分离（如蛋白质纯化）
• 亲和色谱（AC）：特异性识别目标分子（如抗体-抗原结合）

检测标准体系

国内外主要参考标准包括：

1. ISO 13875:2005《液态乳品中乳清蛋白测定-液相色谱法》
2. USP〈621〉色谱法通则（美国药典）
3. GB 23200.121-2021《食品安全标准 植物源性食品中331种农药残留测定》
4. ChP 2020《中国药典》四部 通则0512液相色谱法

实验需遵循GLP规范，定期进行系统适用性试验（理论塔板数、分离度、拖尾因子等指标验证），并采用标准物质（如NIST SRM）进行方法学验证，确保检测结果的准确性和重现性。