结合态甾醇（胆固醇、 胆甾烷醇、 菜籽甾醇、 菜油甾醇、菜油甾烷醇、豆甾醇、β-谷甾醇、豆甾烷醇、 麦角甾醇）检测

结合态甾醇检测概述

结合态甾醇是一类重要的生物活性化合物，包括胆固醇、胆甾烷醇、菜籽甾醇、菜油甾醇、菜油甾烷醇、豆甾醇、β-谷甾醇、豆甾烷醇及麦角甾醇等。这些化合物广泛存在于动植物体内，在食品、药品、化妆品及生物医学领域具有重要应用价值。由于不同甾醇的生理功能与代谢途径差异显著，其含量的检测对产品质量控制、营养评价及安全性评估至关重要。随着分析技术的进步，结合态甾醇的检测方法逐步向高灵敏度、高特异性和高通量方向发展。

检测项目

检测项目涵盖九种主要结合态甾醇：
1. 胆固醇（Cholesterol）
2. 胆甾烷醇（Cholestanol）
3. 菜籽甾醇（Brassicasterol）
4. 菜油甾醇（Campesterol）
5. 菜油甾烷醇（Campestanol）
6. 豆甾醇（Stigmasterol）
7. β-谷甾醇（β-Sitosterol）
8. 豆甾烷醇（Stigmastanol）
9. 麦角甾醇（Ergosterol）
重点检测其总量及单体含量，尤其关注食品标签标示、功能性成分验证及污染物监控中的应用。

检测仪器

主要采用以下高精度仪器设备：
1. 气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）：适用于挥发性和半挥发性甾醇的分离鉴定
2. 液相色谱仪（HPLC）：配备紫外/荧光检测器，用于非挥发性组分分析
3. 超液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）：实现痕量甾醇的高灵敏度检测
4. 核磁共振波谱仪（NMR）：用于结构确证与异构体区分
5. 傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）：辅助成分快速筛查

检测方法

标准检测流程包括三个关键步骤：
1. 样品前处理：采用皂化法（碱性水解）或酶解法释放结合态甾醇，经液液萃取或固相萃取纯化
2. 衍生化处理：使用硅烷化试剂（如BSTFA）或酰化试剂增强色谱响应
3. 仪器分析：
- GC-MS法：DB-5MS色谱柱，程序升温模式，选择离子监测（SIM）定量
- HPLC法：C18反相色谱柱，乙腈-水梯度洗脱，紫外检测波长205-210nm
4. 数据解析：通过保留时间、质谱碎片及标准曲线进行定性与定量分析

检测标准

国内外主要参考标准包括：
1. GB 5009.128-2016《食品中甾醇的测定》
2. AOAC Official Method 994.10（植物甾醇检测）
3. ISO 12228:2021《动植物油脂中甾醇组成测定》
4. USP<42>药典通则（药品中甾醇限量标准）
5. EN 14122:2014（食品补充剂中植物甾醇检测）
各标准对方法学验证参数（线性范围、检出限、精密度、回收率）均有明确要求，一般要求RSD＜5%，回收率85-115%。

（注：实际检测需根据样品基质特性选择适配方法，并定期进行仪器校准与标准物质核查以保证数据可靠性。）