附录C 沉降菌检测

附录C 沉降菌检测

沉降菌检测是环境微生物监测的重要方法之一，广泛应用于制药车间、医院洁净室、食品加工厂及生物实验室等对环境洁净度要求较高的场所。该方法通过自然沉降原理收集空气中的微生物颗粒，评估特定区域内浮游菌的沉降速率和污染水平，为空气洁净度分级和卫生管理提供科学依据。相较于主动采样法，沉降菌检测操作简便、成本低，但需结合暴露时间和环境条件综合分析结果。

检测项目

沉降菌检测主要针对以下项目：
1. 单位时间内单位面积的细菌菌落总数（CFU/m³）
2. 特定微生物种类（如霉菌、酵母菌、致病菌）的定性检测
3. 不同洁净度区域微生物分布的对比分析
4. 消毒措施实施前后的微生物动态变化监测

检测仪器

检测过程需使用以下仪器设备：
1. 沉降平板（常用直径90mm培养皿）
2. 恒温培养箱（温度精度±1℃）
3. 菌落计数器（手动或自动型）
4. 生物安全柜（用于样品处理）
5. 酒精灯及灭菌器具

检测方法

标准操作流程包含以下步骤：
1. 采样点布置：按检测区域面积每10-30㎡设置1个采样点，距地面0.8-1.5m高度
2. 平皿暴露：打开培养皿盖，暴露15分钟至4小时（根据洁净度等级调整）
3. 样品培养：营养琼脂培养基在30-35℃培养48小时，沙氏培养基在20-25℃培养5-7天
4. 菌落计数：肉眼观察或使用菌落计数器统计各平皿菌落数
5. 结果计算：按公式CFU/m³=50000N/(A×T)换算，其中N为菌落数，A为平皿面积(cm²)，T为暴露时间(min)

检测标准

主要依据以下标准规范：
1. GB/T 16294-2010《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》
2. ISO 14698-1《洁净室及相关控制环境生物污染控制》
3. USP<1116>《无菌操作环境的微生物评价》
4. GMP附录1《无菌药品生产质量管理规范》
特殊行业需同时遵守行业特定标准，如医院消毒卫生标准（GB15982）等。