志贺氏菌检测

志贺氏菌检测：关键检测项目与技术解析

摘要 志贺氏菌（Shigella）是引发细菌性痢疾（志贺菌病）的主要病原体，其传播途径以粪-口为主，可通过污染的水源、食物或直接接触传播。由于志贺氏菌感染具有高传染性和潜在重症风险，快速、准确的检测对临床诊疗、食品安全及公共卫生防控至关重要。本文系统梳理志贺氏菌的核心检测项目、技术方法及其应用场景，为相关领域提供参考。

一、志贺氏菌检测的重要性

志贺氏菌分为4个血清群（A-D群），包括痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌和宋内志贺菌，其中痢疾志贺菌致病性强。感染后表现为发热、腹痛、脓血便等症状，严重者可导致脱水、中毒性休克甚至死亡。由于抗生素滥用导致的耐药菌株增加，早期诊断和检测成为防控关键。

二、核心检测项目

志贺氏菌检测需覆盖临床诊断、食品卫生、环境监测等多场景，主要检测项目包括：

1. 病原学检测

• 样本类型：粪便（临床）、食品（如生鲜果蔬、乳制品）、水体、环境拭子等。
• 检测目标：活菌分离、菌株分型、毒力基因鉴定及耐药性分析。

2. 常规检测项目

• 细菌培养与生化鉴定

  • 步骤：选择性培养基（如SS琼脂、XLD琼脂）初筛→三糖铁试验（TSI）→血清凝集试验分型→生化反应（氧化酶、动力试验等）。
  • 优势：金标准，可分离活菌用于进一步研究。
  • 局限：耗时长（3-5天），灵敏度受样本中菌量影响。

• 免疫学检测

  • 方法：酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金试纸条、免疫荧光法。
  • 目标：检测志贺氏菌特异性抗原（如O抗原）或毒素。
  • 特点：快速（1-2小时），适合现场筛查，但可能存在交叉反应。

• 分子生物学检测

  • 技术：PCR、实时荧光定量PCR（qPCR）、基因测序、环介导等温扩增（LAMP）。
  • 靶标基因：ipaH（毒力基因）、rfc（O抗原合成基因）、耐药基因（如blaCTX-M）。
  • 优势：高灵敏度、特异性，可同时检测多毒力因子及耐药性，适用于复杂样本。

3. 分型与溯源检测

• 血清分型：通过多价抗血清确定菌株血清群（如A群痢疾志贺菌）。
• 分子分型：脉冲场凝胶电泳（PFGE）、多位点序列分型（MLST）、全基因组测序（WGS），用于暴发溯源和流行病学研究。

4. 药敏试验

• 方法：纸片扩散法（K-B法）、微量肉汤稀释法。
• 意义：指导临床用药，监测耐药趋势（如对环丙沙星、阿奇霉素的耐药率）。

三、检测标准与流程

1. 临床检测
   • 依据《WS/T 498-2017 细菌性痢疾诊断标准》，优先采用培养+PCR确认。
2. 食品检测
   • 参照GB 4789.5-2016，需经增菌、选择性培养、生化及血清学验证。
3. 环境监测
   • 水体样本需浓缩处理后接种培养基，结合分子检测提高灵敏度。

四、新兴技术与发展趋势

1. 快速检测设备：便携式qPCR仪、微流控芯片可在2小时内完成检测。
2. 宏基因组测序：直接分析样本中微生物群落，无需培养，适用于未知病原筛查。
3. 生物传感器：基于纳米材料或CRISPR技术的传感器，实现超灵敏检测。

五、挑战与展望

• 难点：低菌量样本易漏检，需优化前处理技术（如免疫磁珠富集）。
• 方向：开发多联检试剂盒（同步检测志贺氏菌、沙门氏菌等），推动自动化检测平台普及。

结论 志贺氏菌检测需结合传统方法与分子技术，针对不同场景选择优策略。未来，随着医学和智能技术的发展，检测将更快速、集成化，为疾病防控和食品安全提供更强保障。

参考文献 [1] WHO. Guidelines for the control of shigellosis. [2] 中国食品安全风险评估中心. GB 4789.5-2016 食品微生物学检验 志贺氏菌检验. [3] 美国CDC. Shigella Surveillance Protocol.